Biotin Peptider

Hvad er biotinylerede peptider?

Biotinylerede peptider er peptider, der er blevet modificeret til at inkludere en biotindel. Denne modifikation drager fordel af den høje-affinitetsinteraktion mellem biotin og avidin eller streptavidin, som er meget udbredt i biologiske og biokemiske anvendelser. Biotinmolekylet er lille, stabilt og ændrer ikke væsentligt strukturen eller funktionen af ​​peptidet, samtidig med at det muliggør højeffektiv indfangning eller detektion gennem avidin-baserede systemer.

 

Kemisk modifikation
Biotin introduceres typisk gennem et NHS-biotin (N-hydroxysuccinimidbiotin)-reagens, som reagerer med primære amingrupper, der findes på peptidets N--terminus eller lysinrester, og danner en stabil amidbinding.

生物素（Biotin） 肽（Peptid）

COOH NH2

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（Aktivering） → 缩合（Kobling）

↓ ↓

Biotin-CONH-peptid

 

Affinitetsinteraktion
Det biotinylerede peptid kan binde stærkt (Kd ~10⁻¹⁵ M) til avidin eller streptavidin, hvilket gør det ideelt til brug i assays, der kræver præcis detektion, indfangning eller immobilisering.

Biotinyleret peptidsyntesetilfælde

Peptidsekvens: Biotin-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Længde: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Peptidsekvens: Biotin-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Længde: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Anvendelser af biotinylerede peptider

Biotinylerede peptider er alsidige værktøjer inden for forskning og industri, med en bred vifte af anvendelser, herunder:

Affinitetsrensning

Anvendes til at oprense bindingspartnere såsom proteiner, antistoffer eller nukleinsyrer ved at immobilisere det biotinylerede peptid på streptavidinkugler.

ELISA og Western Blotting

Biotinylerede peptider fungerer som prober til påvisning af specifikke interaktioner, når de kobles med avidin-HRP eller avidin-fluorescerende mærker.

Overfladeplasmonresonans (SPR)

Anvendes til immobilisering af peptider på biosensorchips til interaktionsundersøgelser.

Drug Discovery

Screening af lægemiddelkandidater ved at analysere deres binding til biotinylerede peptidmål.

Immunologi

Biotinylerede peptider bruges til at kortlægge epitoper, studere antigen-antistofinteraktioner og udføre T-celleassays.

Epitopkortlægning til vaccineudvikling

Et brugerdefineret biotinyleret peptid blev brugt til at identificere antigene epitoper af et viralt protein, hvilket hjalp med at designe en vaccinekandidat.

Protein-Proteininteraktionsundersøgelser

Biotinylerede peptider immobiliseret på streptavidin--coatede plader muliggjorde undersøgelsen af ​​receptor--ligand-interaktioner, hvilket afslørede bindingsaffiniteter, der var afgørende for lægemiddeludvikling.

Immunoassay optimering

I et diagnostisk assay blev biotinylerede peptider anvendt som antigener for at forbedre følsomheden og specificiteten af ​​ELISA til påvisning af sygdomsbiomarkør.

 

Referencer

1. Green, NM (1975).Avidin og streptavidin.Biochemical Journal, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L., & Wolf, FJ (1964).Egenskaberne af streptavidin, et biotin-bindende protein produceret af Streptomyces.Archives of Biochemistry and Biophysics, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, & Titus, G. (1994).Biotinylering af proteiner i forskning og bioteknologi.Anal Biochem, 218(1), 1-7.